Sprem za sjeme
Ova metoda čuvanja sperme (ejakulata), kao krioprezervacije, postala je vrlo široko rasprostranjena u kriomedicini. To uključuje dodavanje posebnog medija u sjemenu tekućinu i daljnje zamrzavanje pomoću tekućih para dušika. Razmotrite ovu metodu očuvanja muških zametnih stanica detaljnije i recite što je sperma prikladno za razrjeđivanje i daljnje skladištenje.
Tijekom prirodne gnojidbe, tajna muških genitalnih žlijezda se djelomično miješa sa stanicama epiderme, što dovodi do neke promjene pH okoliša, što dovodi do uništavanja lipoproteinskog pokrova spermih stanica, tj. na svoje aktivacija. Budući da je u ovom stanju, životni vijek reproduktivnih stanica je ozbiljno ograničen, što isključuje njihovu daljnju uporabu za IVF. Zato oni koriste metodu zamrzavanje.
Ova tehnika znatno povećava trajnost sperme i omogućuje vam:
- smanjiti motilitet sperme;
- daje im dodatni izvor energije;
- štiti bakterijske stanične membrane od uništenja;
- sprječava nakupljanje toksičnih metaboličkih proizvoda;
- blokira reprodukciju mikroorganizama u ejakulatu.
Koji se mediji koriste za pohranu sperme?
Kako bi se olakšao tzv. Proces razbijanja ejakulata, potreban za izolaciju zametnih stanica od nje, provodi se preliminarno razrjeđivanje sperme. Koriste se posebni reagensi.
Danas je uobičajeno koristiti sintetičke medije za pohranu sperme, od kojih svaka zahtijeva posebne uvjete. U pravilu, ova vrsta okruženja sastoji se od nekoliko komponenti, obično barem tri od njih. Dakle, u njihovom sastavu mogu se razlikovati šećeri, najčešće se koriste glukoza i laktoza, natrijev citrat.
Ako govorimo o specifičnim kemijskim spojevima koji se mogu koristiti kao sredstvo za pohranu sperme, onda se među njima mogu nazvati Tris pufer, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Pod kojim uvjetima se ejakuliraju?Tehnologija zamrzavanja i skladištenja spermija zahtijeva pridržavanje posebnog režima hlađenja, kao i korištenje posebnih uređaja. Istodobno, sama laboratorijska prostorija mora biti opremljena instrumentima koji steriliziraju zrak.
Prije prikupljanja ejakulata, svi potrebni krioprezervacijski uređaji, posebice različite tikvice, mjerni cilindri, pipete, papirni filtri steriliziraju se u posebnom ormaru na temperaturi od 130-150 stupnjeva. Prije izravnog postupka ograde postavljaju se u poseban termostat koji održava konstantnu temperaturu od 37 stupnjeva.
Nakon prikupljanja uzorka muškog sperma stavlja se u sterilnu tikvicu. Temperatura spremanja sperme treba biti konstantna. Postupak hlađenja provodi se u 2 faze.
U prvom od ovih, ejakulacija se najprije stavlja u rashladnu komoru, u kojoj se temperatura postepeno spušta. U pravilu, vrijednost je -35 stupnjeva. Nakon toga, duboko zamrzavanje se provodi uranjavanjem posebne tikvice s spermom u tekući dušik. U ovom stanju, rok trajanja sperme može doseći nekoliko desetljeća.
Da bi koristili ejakulatu prethodno krioprezerviran, posuda se stavlja s njom u toploj vodi, pri čemu se javlja spor spuštanje. Nakon toga, upotrijebljeni krioprotektanti uklanjaju se ponavljanjem ponovne obnavljanja sperme u centrifugi. Nakon toga, sama sjemena tekućina zamjenjuje hranjivi medij u kojem se naknadno smještaju spermatozoidi.